UJI ANTIBAKTERI SEDIAAN OBAT KUMUR EKSTRAK DAUN

by D PANDAN · 2017 · Cited by 1 — Penetapan Kadar Air dilakukan dengan menggunakan alat moisture balance. Kadar air serbuk pada umumnya yaitu tidak lebih dari 5 %. (DepKes, 2000)

169 KB – 7 Pages

PAGE – 1 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) UJI ANTIBAKTERI SEDIAAN OBAT KUMUR EKSTRAK DAUN PANDAN WANGI ( Pandanus amaryllifolius Roxb) TERHADAP Streptococcus mutans Oom Komala 1 2 dan Dwi Indriati 3 1 Program Studi Biologi FMIPA Universitas Pakuan, Bogor 2,3 Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Pakuan , Bogor e – mail : komalaoom20@yahoo.co.id ABSTRACT Pandanus amaryllifolius Roxb leaf has potential as an antibacterial. The research aims to know the ability of stocks to mouthwash scented pandan leaf extract inhibits Streptococc us mutans and in determining the fragrant pandanus phytochemicals compounds. Wide – Area Drag testing (LDH) mouthwash extracts was performed with a concentration of 15%, 17.5% and 20%. Test the phytochemical saponins, alkaloids, tannins and flavonoids qualit atively on 0.5 g powder. Testing stabilita include organoleptik observations of color, aroma, taste preparation, test the pH, specific gravity and viscosity. The results showed that the material of pandanus leaf extract mouthwash scented antibacterial nat ure against Streptococcus mutans with a concentration of extracts of 15%, 17.5% and 20% showed values of LDH consecutive 16.3 mm; 22.6 mm and 28.3 mm earlier in the week while in week 8 loss to the value of LDH is 12.5 mm; 15.5 mm; and 19.6 mm. The active compounds in the leaves of pandanus is alkaloids, saponins, tannins and flavonoids. Mouthwashes stored at 25 – 30 ° C for 8 weeks are relatively stable for color, flavor, taste, pH, specific gravity, and viscosity, compared to a temperature of 40 o C. Key words : Pandan fragrance, Streptococcus mutans , mouthwash PENDAHULUAN Kesehatan mulut merupakan hal yang penting bagi manusia terutama dalam pergaulan sehari – hari. M asyarakat memiliki kecenderungan pola konsumsi yang mengarah pada tumbuhnya bakteri Streptococcus . Penyakit yang paling umum terjadi dalam kesehatan mulut diantaranya gigi berlubang (caries ) dan jaringan pendukung gigi (periodontal) plak gigi umumnya diseb abkan oleh Streptococcus . , yang sampai saat ini masih menjadi masalah utama dalam bidang kesehatan mulut dan gigi (Syamsuhidayat dan Hutapea, 1994). Bakteri yang berperan penting dalam pembentukan plak adalah bakteri yang mampu membentuk polisakari da ekstraselular, yaitu genus Streptococcus . Bakteri yang ditemukan dalam jumlah besar pada plak penderita caries adalah Streptococcus mutans (Roeslan, 1996; Karpinski and Szkaradkiewicz, 2013). Menurut Robinson (1995) dan Dumaoal et al (2010) daun panda n wangi memiliki khasiat sebagai antibakteri karena kandungan zat kimia dari daun pandan wangi seperti alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, polifenol dan steroid merupakan senyawa metabolit sekunder pada tumbuhan yang bersifat antibakteri. Sediaan obat kum ur didefinisikan sebagai sediaan berupa larutan, umumnya dalam konsentrasi pekat yang harus diencerkan dahulu sebelum digunakan, dimaksudkan untuk digunakan sebagai pencegahan atau pengobatan infeksi tenggorokan (DepKes, 1979). Dengan penemuan obat kumur y ang efektif berbahan pandan wangi sebagai antibakteri, meminimalkan risiko karies gigi masyarakat. Tujuan penelitian adalah membuat sediaan obat kumur daun pandan 14

PAGE – 2 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) wangi yang memiliki sifat sebagai antibakteri. BAHAN DAN METOD E Daun pandan wangi segar dik umpulkan dan dibersihkan dari kotoran – kotoran dengan air mengalir sampai bersih. Daun yang telah bersih dirajang dengan ketebalan ± 2 cm, kemudian dikeringkan didalam oven pada suhu 40 o C – 60 o C selama 24 jam, atau sampai kering. Simplisia yang telah disortas i kemudian digrinder hingga menjadi simplisia serbuk dan diayak dengan menggunakan ayakan mesh 40 lalu ditimbang. Di simpan dalam wadah yang kering dan bersih. Penetapan Kadar Air d ilakukan dengan menggunakan alat moisture balance. Kadar air serbuk pada umumnya yaitu tidak lebih dari 5 % (DepKes, 2000). Syarat kadar abu : tidak lebih dari 9% (DepKes, 1985). Ekstrak kental daun pandan wangi diperoleh melalui metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70% (1:10). Maserat yang dihasil kan kemudian dikumpulkan dan dipekatkan dengan rotary evaporator hingga didapat ekstrak kental. Uji Fitokimia terhadap Alkaloid (reagen Dragendroff), Flavonoid (Mg dan asam klorida), Tanin (Feri klorida 0,1%), Saponin (minyak zaitun) secara kualitatif berd asarkan Rajendra, et al. ,( 2011). Uji aktivitas antibakteri ekstrak dilakukan melalui penetapan konsentrasi hambat minimum (KHM) metode dilusi agar, dengan konsentrasi adalah 5%, 10%, 15%, dan 20% dari 10 g/10 ml b/v. S ediaan obat kumur dibuat dengan tiga formula, dengan konsentrasi ekstrak daun pandan wangi berbeda, seperti Tabel 1. Evaluasi sediaan obat kumur ekstrak daun pandan wangi dilakukan melalui uji stabilitas organoleptik (warna, rasa, dan aroma), pH, berat jenis dan viskositas selama 2 – 8 minggu pada penyimpanan dalam suhu kamar (28 – 30 o C) dan suhu stabilitas dipercepat (40 o C). Pengukuran v iskositas dilakukan dengan menggunakan Viskome ter Brookfield. Berat jenis dari sediaan obat kumur ditentukan dengan piknometer. Uji hedonik dilakukan untuk mengetahui tingkat kesukaan terhadap 20 orang panelis yang terdiri dari laki – laki dan perempuan. Den gan penentuan skala sebagai berikut 1 (Sangat tidak suka), 2 (Tidak suka), 3 (Agak suka), 4 (suka), 5 (sangat suka) Tabel 1 . Formula Sediaan Obat Kumur Formulasi F0 F1 F2 F3 Ekstrak Pandan Wangi – 15 17,5 20 Alkohol 70% 10 10 10 10 Sakarin 0,5 0,5 0,5 0,5 Gliserin 10 10 10 10 Mentol 0,5 0,5 0,5 0,5 Peppermint 0,7 0,7 0,7 0,7 Tween 80 0,3 0,3 0,3 0,3 PEG 4000 0,5 0,5 0,5 0,5 Aquadest Ad 100 Ad 100 Ad 100 Ad 100 Keterangan : F0 : kontrol Pengujian efektivitas obat kumur ekstrak daun pandan wangi dilakukan dengan metode difusi cakram. Kertas cakram yang sudah direndam dalam formula larutan obat kumur ekstrak pandan wangi selama 15 menit, kemudian di angin – anginkan selama 5 menit lalu dileta kkan diatas media agar Mueller hinton yang sudah berisi bakteri uji dan selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Aktivitas antibakteri dilihat dengan terbentuknya lebar daerah hambat disekitar kertas cakram. Kontrol positif digunakan larutan Amoksicillin 0,1g/100 mL dan kontrol negatif menggunakan basis (F0). Lebar daerah hambat dianalisis menggunakan ANOVA RAL dengan 5 perlakuan dan 4 kali pengulangan. Analisis dilanjutkan dengan uji Duncan untuk membandingkan daya antibakteri diantara ma sing – masing perlakuan. 15

PAGE – 3 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) HASIL DAN PEMBAHASAN Serbuk dan Ekstrak Kental Daun Pandan Serbuk simplisia daun pandan wangi berwarna hijau muda dengan tekstur serbuk halus dan berbau aromatik yang khas. Serbuk yang diperoleh sebanyak 1500 gram dari 4 kg daun segar yang sudah disortasi sehingga diketahui persen rendemen simplisia daun pandan wangi adalah 37,5%. Penetapan kadar air menggunakan alat moisture balance dilakukan sebanyak tiga kali menunjukkan hasil sebesar 4,68%, hal ini sesuai dengan ketetapa n DepKes (2000) yaitu tidak lebih dari 5 %. Kadar abu serbuk simplisia didapat sebesar 7,5%, sesuai dengan ketentuan DepKes. (1985) Syarat kadar abu tidak lebih dari 9%. Ekstrak daun pandan wangi yang diperoleh dengan proses maserasi berwarna hijau kec oklatan. Hasil ekstrak sebanyak 766 gram dari 1000 gram serbuk simplisia sehingga diketahui rendemen ekstrak sebesar 76,6%. Uji Fitokimia Dari data uji fitokimia Tabel 3, flavonoid hasil positif dengan terbentuknya warna jingga. Flavonoid berfungsi unt uk membentuk kompleks dengan protein sehingga akan merusak membran sel bakteri. Flavonoid memiliki aktivitas menghambat organisme menurut Zamora – Ros et. al. ( 2012), juga dapat menyebabkan kerusakan pada Fusarium oxysporum menurut Galeotti et. al. ( 2008). Tanin hasil positif dengan terbentuknya endapan putih. Tanin dapat merusak sel dinding bakteri. Saponin hasil positif dengan timbulnya buih atau busa setelah dikocok kuat selama 10 detik. Saponin berfungsi untuk mempengaruhi membran sitoplasma seh ingga sel mikroba menjadi rusak. Menurut Akinjogunla et. al (2010) saponin dapat meningkatkan permeabilitas membran sel sehingga sel mengalami kerusakan . Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) didasarkan pada konsentrasi terendah ekstrak daun pandan wangi yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Hasil dapat dilihat pada Gambar 1 . 5% 1 0 % 15% 20% Gambar 1 . Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Ekstrak Daun Pandan Wangi Terhadap Bakteri Streptococcus mutans Tabel 2 . Hasil Uji Fitokimia No Uji Hasil kesimpulan 1 Mg dan asam klorida terbentuknya warna jingga Terdapat flavonoid 2 Feri klorida 0,1% terbentuknya endapan putih Terdapat tanin 3 minyak zaitun timbulnya buih atau busa Terdapat saponin 4 Dragendroff terbentuknya endapan coklat Terdapat Alkaloid 5 Mayer Terbentuk endapan putih kekuningan Terdapat Alkaloid 16

PAGE – 4 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) Berdasarkan hasil pengamatan yang dilakukan pada konsentrasi 5%, 10%, 15% dan 20% dari 10 g/10 ml b/v , pada konsentrasi di atas 15% ekstrak daun pandan wangi menunjukkan daya hambat yang ditandai dengan tidak adanya pertumbuhan bakteri, hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak daun pandan wangi terseb ut memiliki sifat bakteriosidal, s ehingga Konsentrasi Hambat Minimum terhadap b akteri Streptococcus mutans berada pada konsentrasi 15%. Hasil pe nelitian ini sama dengan hasil penelitian Emeilia Dwita (2014) bahwa ekstrak daun pandan wangi memiliki aktivitas antibakteri terhadap A ggregat ibacter actinomycetem – comitans flora normal rongga mulut yang dapat menyebabkan per iodontitis agresif konsentrasi h ambat minimum pada konsentrasi 10%. Sediaan Obat Kumur Sediaan obat kumur yang mengandung ekstrak daun pandan wangi dibuat dengan konsentrasi 15% (F1), 17,5% (F2) dan 20% (F3). Pelarut yang digunakan untuk melarutkan zat aktif adalah alkohol 70%. Pemanisnya menggunakan gliserin dan sakarin, penyegarnya mengg unakan peppermint dan menthol, tween 80 dan PEG 4000 sebagai surfaktan campuran. Hasil dari ketiga formula menunjukkan adanya hubungan konsentrasi ekstrak dengan warna, semakin tinggi konsentrasi zat aktif maka warna yang dihasilkan semakin gelap. Hasil yang paling gelap adalah formula tiga dengan konsentrasi ekstrak daun pandan wangi 20% (Gambar 2 ). 15% 17,5% 20% Gambar 2. Sediaan Obat Kumur Aroma dari ketiga formula sama yaitu peppermint, sedangkan rasa pada awal pengamatan minggu ke – 0 ketiga formula memiliki rasa manis. Semua formula tetap memenuhi persyaratan pada penyimpanan suhu kamar maupun suhu panas (40 o C) dimana pH sediaan yang diperoleh mempunyai rentang nilai pH 5 – 6 dan dinyatakan memenuhi syarat standar kosmetika yang baik yaitu 4,5 – 7,5 (Tranggono, 1992). Evaluasi Obat Kumur Berdasarkan hasil evaluasi obat kumur terlihat pada Tabel 3 . Tabel 3 . Hasil Evaluasi Sediaan Obat Kumur Evaluasi Formula Organoleptik I II III Warna Coklat Coklat m uda Coklat tua Rasa M anis Manis – agak pahit Manis – agak pahit Aroma peppermint peppermint peppermint pH 5,l6 5,24 5,24 Berat Jenis 1,040 g/ml 1,044 g/ml 1,048 g/ml Viskositas 563 cP 1055 cP 1615 cP Uji Hedonik Pengujian hedonik dilakukan untuk mengetahui formula mana yang disukai oleh panelis. Penilaian uji hedonik dilakukan dengan angka diantaranya 1: sangat tidak suka; 2: tidak suka; 3: agak suka; 4: suka dan 5: sangat suka. Hasil uji hedonik men unjuk kan bahw a pada warna dan aroma p anelis lebih menyukai formula 1, s edangkan pada rasa panelis lebih menyukai formula 2. Uji Organoleptik Penentuan organoleptik dilakukan setiap 2 minggu selama 8 minggu meliputi warna, rasa dan aroma. Warna sediaan yang disimpan pada suhu kamar dan suhu 40 o C selama 8 minggu relatif stabil, dimana warna yang dihasilkan setelah selesai pembuatan yaitu formula 1 coklat, formula 2 berwarna coklat muda, dan 17

PAGE – 5 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) formula 3 berwarna coklat tua. Pengamatan parameter aroma sediaan pada suhu ka mar dan suhu 40 o C dari waktu pembuatan sampai minggu ke delapan mempunyai aroma yang stabil. Formula 1, formula 2 dan formula 3 memiliki bau yang khas peppermint. Pengamatan parameter rasa, formula 1, formula 2 pada suhu kamar dan suhu 40 o C mempunyai rasa yang stabil. Sedangkan formula 3 pada suhu kamar pada minggu ke empat sampai minggu ke delapan mempunyai rasa yang tidak stabil. Pada awal pembuatan sampai minggu ke dua mempunyai rasa manis, tetapi pada minggu ke empat sampai minggu ke delapan mengal ami perubahan rasa menjadi agak pahit. Selanjutnya pada formula 2 dan formula 3 pada suhu 40 o C dari minggu ke empat sampai minggu ke delapan mempunyai rasa yang tidak stabil dari manis ke agak pahit. Uji pH Pengukuran nilai pH semua formula tetap memenu hi persyaratan pada penyimpanan suhu kamar maupun suhu panas (40 o C) dimana pH sediaan mempunyai rentang nilai pH 5 – 6 dan dinyatakan memenuhi syarat standar kosmetika yang baik yaitu 4,5 – 7,5. Uji Berat Jenis Berdasarkan hasil pengukuran berat jenis, pada awal dan ak hir penyimpanan mengalami kenai kan dan penurunan berat jenis te tapi nilai penurunan atau kenai kan tidak berbeda jauh sehingga dapat disimpulkan hasil pengukuran berat jenis sediaan selama penyimpanan 8 minggu relatif stabil, baik itu pada suhu kamar maupun pada suhu 40 o C. Uji Viskositas Berdasarkan hasil pengujian viskositas formula 3 menunjukkan nilai viskositas yang paling tinggi yaitu 1615 cP dibandingkan dengan formula 1 dan formula 2 pada awal penyimpanan. Viskositas pada formula 1 yaitu 563 cP dan formula 2 1055 cP. Dapat disimpulkan bahwa penambahan ekstrak daun pandan wangi dalam sediaan obat kumur dapat menaikkan viskositas sediaan. Meningkatnya viskositas itu baik, semakin tinggi viskositas maka akan semakin besar tahanannya (Martin , 1993). Viskositas merupakan salah satu evaluasi fisika yang dapat dijadikan parameter untuk menunjukkan kestabilan suatu produk farmasi selama penyimpanan. Pengujian viskositas dari sediaan dilakukan untuk mengetahui konsistensi sediaan selama 8 minggu penyimpana n suhu kamar dan suhu panas. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Pengujian Lebar Daerah Hambat (LDH) Pada konsentrasi 15%, 17,5% dan 20% ekstrak daun pandan wangi memiliki lebar daerah hambat yang lebih rendah bila dibandingkan dengan kontrol positif yaitu amoksicillin. Pada (Gambar 3) dapat dilihat bahwa zona hambat yang dihasilkan oleh sediaan obat kumur ekstrak daun pandan wangi pada konsentrasi 20% mempunyai perbedaan nyata efektivitas antibakterinya terhadap bakteri Streptococcus mutans dibanding kan dengan konsentrasi yang lainnya. Apabila dibandingkan dengan kontrol positif yaitu amoksicillin 0,1g/100 mL maka konsentrasi pada sediaan tersebut memiliki efektivitas antibakteri yang lebih rendah. Gambar 3. Hasil Uji Lebar Daerah Hambat (LDH) Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan Wangi 18

PAGE – 6 ============
Ekologia , Vol. 1 7 No. 1 , April 20 1 7 : 14 – 20 Uji Antibakteri Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Pandan .. ( Oom Komala , dkk ) Pada konsentrasi diatas 15% ekstrak daun pandan wangi menunjukkan daya hambat yang cukup besar ditandai dengan tidak adanya pertumbuhan. Berdasarkan hasil pengamatan terlihat adanya perbedaan diameter hambatan dari masing – masing konsentrasi yang disebabkan oleh kecepatan ekstrak berdifusi ke medium agar. Terhadap Propionibacterium acnes dan Pseudomonas aeruginosa juga ekstrak daun pandan wangi dapat menghambat ( Setiorini, 2011) . Amoksicillin menghasilkan lebar daerah hambat yang absolut terhadap bakteri Streptococcus mutans , karena amoksicillin merupakan antibiotik yang dapat menghambat sintesis dinding sel bakteri dan mampu menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif maupun Gram negatif. Hasil penelitian Dumao al et al ., (2010) menunjukkan bahwa 40% ekstrak air daun pandan ( Pandanus amaryllifolius ) memiliki aktifitas membunuh terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923. Berdasarkan hasil uji aktivitas basis masih menunjukkan hambatan karena pada komponen bahan dasar obat kumur diduga memiliki daya hambat antibakteri. Golongan senyawa aktif yang terdapat pada daun pandan wangi seperti flavonoid, tanin, saponi n dan alkaloid bersifat sebagai antibakteri. Identifikasi senyawa dengan metode uji tabung dan kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pandan wangi mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, dan minyak atsiri ( Setiorini, 2011) Berdasarkan analisis menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan uji Duncan menunjukkan bahwa konsentrasi 15%, 17,5% dan 20% mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans dengan pengaruh berbeda nyata antar perlakuan. Hasil uji hedonik menyatakan bahwa pada warna dan aroma panelis lebih menyukai formula 1. Sedangkan pada rasa panelis lebih menyukai formula 2. SIMPULAN 1. Sediaan obat kumur ekstrak daun pandan wangi be rsifat antibakteri terhadap Streptococcus mutans . Semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun pandan wangi yang digunakan dalam sediaan, maka semakin tinggi pula aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans. 2. Sediaan obat kumur ekstrak daun pandan wangi mempunyai kestabilan lebih baik pada suhu kamar (25 – 30 o C) dibandingkan pada suhu 40 o C. SARAN Penggunaan ekstrak daun pandan wangi sebagai obat kumur disarankan dengan konsentrasi 15 – 17,5% karena sesuai hasil uji hedonik. Sediaan obat kumur ini disarankan disimpan pada suhu 25 – 30 o C supaya stabil. DAFTAR PUSTAKA Akinjogunla OJ, Yah CS, Eghafona NO and Ogbemudia FO. 2010 . Antibacterial activity of leave extracts of Nymphaea lotus (Nymphaeaceae) on Methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Vancomycin resistant Staphylococcus aureus (VRSA) isolated from clinical samples . Annuals of Biological Research 1 (2), 174 – 184. Dalimartha S. 2000. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid I. Jakarta:Trubus Agriwidya, DepKes RI. 1979. Farmakope Indones ia. Jilid III . Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta. __________. 1985. Materia Medika Indonesia. Jilid V. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta. __________. 2000. Penetapan Kadar Air . Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta. Dumaoal, OSR, Alaras, LB, Dahilan KG, Sarah, Depadua AA, Pulmones, CJG. 2010. In Vitro Activity of Pandan (Pandanus amaryllifolius) Leaves Crude Extract Against Selected Bacterial Isolates . 19

169 KB – 7 Pages